Реклама
|
Бактериологическая диагностика лептоспирозаЛабораторному исследованию на лептоспироз подвергают органы от павших животных; прижизненно исследуют кровь (в первые дни заболевания) и мочу (с 8-го дня заболевания). Микроскопическое исследование осуществляют при помощи конденсора с центральным затемнением, применяемого для исследования в «темном поле». Источником света служит электрическая лампа в 100—200 свечей или прямые лучи солнца. Материал исследуют в виде раздавленной капли. Микроскопирование производят после соответствующей обработки материала: кровь, взятую из вены, смешивают с цитратом натрия (1,5-проц. раствор) в соотношении 1:2, отстаивают не менее часа до образования сверху прозрачного, свободного от эритроцитов слоя, из которого и просматривают не менее 10 препаратов. Мочу (свежевыпущенную) перед исследованием подвергают длительному, не менее 2 час., центрифугированию, после чего из осадка микроскопируют также не менее 10 препаратов. Органы (печень, почки, надпочечники, мозг) растирают в ступке (2 г органа и 3 мл физиологического раствора) и после часового отстаивания из прозрачного слоя взвеси приготавливают препараты для микроскопирования. При микроскопическом исследовании живые Leptospira icterohaemorrhagiae представляются в виде тонких, волнистых нитей (длина 5—18 толщина 0,2—0,3 мкм,), обладающих активной подвижностью. Окраску препаратов можно, производить по Романовскому — Гимза (лептоспиры розовофиолетового цвета), по Бурри (на черном фоне — неокрасившиеся лептоспиры), по Киктенко. Последний метод состоит в следующем: сухой нефиксированный мазок обрабатывают 1 мин. при слабом подогревании протравой (100 мл дестиллированной воды, 2 мл формалина, 0,2 г таннина и 5 мл 4-проц. спиртового раствора иода), после удаления протравы препарат окрашивают при слабом подогревании в течение 45—50 сек. спиртовым раствором генцианвиолета (1 г краски и 100 мл 25-проц. спирта). После окрашивания препарат промывают водопроводной водой, высушивают и микроскопируют. Лептоспиры окрашиваются в краснофиолетовый цвет, отчетливо выделяясь на бесцветном фоне. Для выращивания L. icterohaem. применяют питательные среды (рН 7,2—7,4) с кровяной сывороткой (Ферворт—Вольфа, Уленгута). После засева материала среда покрывается слоем стерильного вазелинового масла, и выращивание производят в термостате при температуре 25—35°. Диагностика лептоспироза может осуществляться реакцией агглютинации — лизиса. Проводят ее с кровью больных животных, начиная с 8-го дня заболевания. Для реакции применяют молодые 5—10 дней) культуры L. icterohaem., не обладающие спонтанной агглютинацией. После соответствующего разведения сыворотки крови больного животного (с 1: 10 до 1:1000 и выше) ее разливают по 0,2 мл из каждого разведения в отдельные пробирки, куда затем добавляют по 0,2 мл культуры. Пробирки встряхивают, помещают на полчаса-час в термостат при температуре 30—32°, после чего проводят учет реакции микроскопически просмотром в темном поле препаратов (раздавленная капля), приготовленных из каждой пробирки. Реакция лизиса характеризуется зернистым набуханием лептоспир и распадом их на отдельные фрагменты, реакция агглютинации — образованием «паучков» — склеившихся лептоспир. Реакция агглютинации считается сомнительной при наличии ее в разведении сыворотки 1 : 400 и положительной - 1 : 800 и выше. В первые дни заболевания минимальным диагностическим титром можно считать 1:100.
Дезинфекция птичников. Дезинфекция крольчатников -1 |
Реклама
"> |