Характер роста микробов на обычных бактериологических средах и физико-химические изменения последних дают сведения о физиологических свойствах изучаемого микроба, необходимые для определения его.
Каждая из пяти обычных сред дает ту или иную характеристику.
Мясо-пептонный косой агар позволяет проверить чистоту культуры, а также свойственный виду микроба характер роста. Последний может быть сплошной по всей среде или только по линнн посева или точечный, с ровными краями, волнистыми, лопасевидными и волокнистыми. Наложение может быть сухое, влажное, слизистое, бесцветное или имеющее тот или иной пигмент и т. д.
По мясо-пептонному бульону устанавливают:
1) образование на поверхности бульона пленки, состоящей из микробных тел, что указывает на потребность его в кислороде (обязательный аэроб); микробы, безразлично относящиеся к кислороду, не образуют пленки (факультативные анаэробы);
2) помутнение среды, образуемое обычно подвижными микробами; иногда помутнение вызывают неподвижные микробы за счет образования муцина (например стафилококки);
3) образование на дне осадков из микробов (хлопьевидных, крошковатых и слизистых).
В бульонной культуре также изучают и продукты обмена микробов.
Газообразование изучается помещением в бульон (до его стерилизации) в перевернутом виде маленькой так называемой бродильной пробирки. При стерилизации весь воздух из нее вытесняется и она заполняется бульоном. В случае образования микробом газов, они скапливаются в пробирке.
Выделение аммиака изучают помещением в пробирку над средой полоски смоченной красной лакмусовой бумажки. Посинение бумажки свидетельствует о выделении аммиака.
Выделение сероводорода определяют помещением в пробирку над средой полоски фильтровальной бумажки, смоченной уксуснокислым свинцом. При наличии сероводорода бумажка через некоторое время чернеет.
Для тех же целей иногда засевают МПА с добавлением 1% уксуснокислого свинца. Такой агар после стерилизации охлаждают столбиком. Сеют уколом по стенке пробирки. При выделении сероводорода по линии укола происходит почернение.
Индолообразование устанавливают реакцией Сальковского или Легаль-Вейля.
Реакция Сальковского. К семидневной бульонной культуре добавляют 1 мл 0,02-проц. раствора азотистокислого калия и затем несколько капель концентрированной серной кислоты. Красное окрашивание указывает на наличие индола.
Реакция Легаль-Вейля. К 3—5-дневной бульонной культуре прибавляют:
1) 5—6 капель 5-проц. раствора нитропруссидного натрия;
2) 5—6 капель 40-проц. раствора едкого натра (или кали) и
3) 6—7 капель ледяной (или 8—10 капель крепкой) уксусной кислоты.
После каждого добавления пробирку встряхивают. В присутствии индола происходит синезеленое окрашивание. Реакция Легаль-Вейля является весьма чувствительной.
По росту в мясо-пептонной желатине выявляют два свойства изучаемых микробов:
1) аэробиоз (т. е. является ли микроб обязательным или факультативным аэробом), и
2) наличие у микроба протеолитического фермента.
Первое свойство микробов изучается по месту роста микроба; если микроб растет только на поверхности среды, то он обязательный аэроб, если по всему уколу равномерно — факультативный анаэроб, если только на дне пробирки — обязательный анаэроб. Второе свойство — наличие протеолитнческого фермента — выявляют на основании разжижения желатины. Некоторые микробы желатину не разжижают (отсутствие фермента), другие разжижают (наличие фермента). Имеются также микробы со слабыми протеолитическими ферментами, образующими в желатине «елочку» или «ламповую щетку».
По росту в молоке выясняют наличие или отсутствие следующих трех ферментов: лактазы, хемозина, казеазы.
В молоке имеется молочный сахар (лактоза), расщепляющийся при наличии у микроба фермента лактазы на декстрозу и галактозу, которые претерпевая дальнейший распад вещества, образуют молочную кислоту. Накопление в среде кислоты ведет к свертыванию казеина при кислой реакции. Свертывание казеина также вызывается наличием у микробов хемозина, что происходит при нейтральной реакции.
Кроме явления свертывания молока, может быть под действием микробов и пептонизация его, проявляющаяся в просветлении молока. Пептонизация или расщепление молочного белка (казеина) до пептонов происходит под действием протеолитического фермента — казеазы. В случае наличия у микробов лактазы и казеазы происходит сначала свертывание казеина (при кислой реакции), а затем пептонизация сгустка.
Рост на картофеле из-за недостаточной его питательности возможен только для небольшой группы патогенных микробов. На картофеле изучается пигментообразование микробов, благодаря богатству в картофеле солей магния и железа, которые способствуют образованию пигментов.