Определение концентрации спермиев в сперме производят путем подсчета их под микроскопом в счетной камере для форменных элементов крови с сеткой. Для, этого в предварительно промытый водой, спиртом, эфиром и высушенный меланжер набирают сперму. Затем заполняют его дестиллированной водой, которая разбавляет сперму и умерщвляет спермий (табл.).
Оба конца меланжера зажимают большим и указательным пальцами и встряхивают его в течение 2—3 мин. Первые несколько капель из меланжера выбрасывают, потом небольшую каплю смеси наносят на сетку камеры, которую предварительно промывают чистой водой и вытирают. Затем сетку покрывают покровным стеклом и плотно притирают его к камере до появления радужных колец. Подсчет производится под микроскопом с увеличением до 400 раз в 4 больших квадратах по диагонали и одном в стороне, всего в 5. В каждом большом квадрате спермин подсчитывают в 16 маленьких квадратах. Таким образом подсчет производят в 80 маленьких квадратиках.
Положение спермия внутри или вне квадрата определяют по месту нахождения головки. Если головка спермия лежит на правой и нижней линии квадратика, спермии считают внутри квадрата, а по левой и верхней — вне его.
Для точности подсчет производят два раза из того же меланжера. Если расхождение в подсчете достигает 10% и более, то производят подсчет третьей капли из того же меланжера и выводят среднее количество спермиев.
Количество подсчитанных спермиев делят на 80 и получают среднее количество в одном маленьком квадрате.
Площадь маленького квадрата составляет 1/400 мм2, глубина его 0,1 мм. Таким образом, объем его составляет 1/4000 мм2 или 1/4000000 см2. Поэтому, чтобы узнать число спермиев в 1 см3, нужно среднее число спермиев в одном малом квадрате умножить на 4 000 000 и на степень разведения.
Чтобы подсчитать общее количество спермиев в эякуляте, нужно количество их в 1 см3 умножить на объем эякулята, выраженный в кубических сантиметрах.
Концентрацию спермиев в сперме от жеребца определяют и по специальным стандартам. Они представляют собой запаянные пробирки, в которых находится сперма жеребца (или похожая на нее жидкость) с различным содержанием спермиев в 1 мл: 10, 50, 100, 200, 300, 500 и 1000 млн. спермиев.
Для определения концентрации спермиев полученную сперму наливают в пробирку такого же диаметра, как и стандарт, и сравнивают с жидкостью, находящейся в стандартных пробирках. Предварительно пробирки, содержащие стандарт, тщательно встряхивают и переворачивают несколько раз. Просмотр пробирок производят на свету, причем к определяемой сперме подбирают стандарт наиболее близкий по густоте. Для оЦределения же общего количества спермиев в полученном эякуляте умножают объем его на установленное число спермиев.
Средний объем эякулята (в мл): у жеребца 50—120, у быка 4, у барана 1.
В 1 мл спермы содержится спермиев (в млрд.): у жеребца 0,1—0,25, у быка 1, у барана 2.