Сперму вливают в полость матки. Для этого резиновый катетер вводят вместе с рукой во влагалище и затем продвигают в шейку матки на глубину 10—12 см. Доза разбавленной или неразбавленной спермы 30 мл, причем кобылам шаговых пород, а также кобылам в первый месяц после вы жеребки вводят 35—40 мл. В тех случаях, когда на пункт доставят большое количество кобыл и запас спермы ограничен, уменьшают дозу спермы до 20 мл. Эта доза спермы является минимальной. При подозрении на заразное заболевание кобыл используют эбонитовый или стеклянный катетер, который вводят на такую же глубину в шейку матки, предварительно введя во влагалище зеркало.
Перед первым осеменением и после каждых 3—4 впрыснутых доз с конца катетера берут каплю спермы и проверяют подвижность спермиев под микроскопом.
Неразбавленную сперму расходуют в течение не более 30 мин. с момента получения. В тех случаях, когда осеменение затягивается на более продолжительный срок, сперму обязательно разбавляют.
При осеменении кобыл привозной спермой применяют ампульный способ. Стеклянная ампула емкостью в 30 мл служит сосудом для перевозки спермы и вместе с тем прибором для введения спермы в матку кобылы. Для осеменения кобылы с узкого конца ампулы снимают колпачок и на его место надевают резиновую трубку, снабженную фильтром, состоящим из стеклянной трубки с расширением, куда вложен кусок ваты. В свободный конец резиновой трубки предварительно вставляют спринцовку, служащую для выталкивания спермы из ампулы воздухом, выжимаемым из спринцовки. Подготовленную для введения ампулу с надетой резиновой трубкой держат в левой руке, вверх свободным концом, с которого снимают резиновый колпачок. Правую руку вводят в преддверье влагалища и в нее передают левой рукой ампулу так, чтобы она расположилась на ладони, а указательный палец закрыл отверстие ампулы. Затем тупой конец ампулы направляют правой рукой в канал шейки матки. Перебирая пальцами правой руки и вместе с этим левой рукой подавая резиновую трубку, проталкивают ампулу в шейку матки на глубину 9—10 см. После этого, наклонив ампулу несколько вниз, спринцовку сжимают, и сперма, под давлением воздуха, выталкивается в матку. Затем ампулу осторожно извлекают наружу.
При переходе от одного животного к другому, фламбируют зеркало или опускают его в кипяток на 3—4 мин. Катетер или резиновую трубку обтирают ватным тампоном, смоченным 65° спиртом, или опускают в кипяток. Если применяется спирт, то следят, чтобы он не попал внутрь трубки.
Если осеменитель манипулирует рукой во влагалище, то при переходе от одного животного к другому руку до плеча протирают ватой, смоченной спиртом-ректификатом.